Diệp Thế Tài(1), Nguyễn Thị Nguyệt(2), Trương Xuân Liên(2), Phẩm Minh Thu(2).
(1) Pḥng vi khuẩn, Viện Pasteur TP. HCM, (2) Khoa xét nghiệm lâm sàng, Viện Pasteur TP. HCM.
Mục tiêu: Nghiên cứu và ứng dụng multiplex PCR trong phát hiện gen mă hóa độc tố SEA, SEB của S. aureus trong thức ăn nhanh tại thành phố Hồ Chí Minh.
Phương pháp: Cắt ngang, xác định độ nhạy, độ đặc hiệu của multiplex PCR dùng khuyếch đại đồng thời gen mă hóa độc tố SEA, SEB trên 30 chủng S. aureus thu thập từ năm 2004 – 2005. Sau đó, ứng dụng multiplex PCR này để phát hiện trực tiếp sự hiện diện của những gen mă hóa độc tố SEA, SEB trong 94 mẫu thức ăn nhanh.
Kết quả: Trên 30 chủng nghiên cứu, multiplex PCR có thể khuyếch đại gen mă hóa độc tố với kích thước 270 bp, 165 bp cho SEA, SEB tương ứng. Độ đặc hiệu của phản ứng là 100% và không có sự bắt cặp chéo lẫn nhau giữa các mồi, độ nhạy 104 CFU/ml. Trong 94 mẫu thức ăn nhanh, 4 (4%) mẫu mang gen mă hóa độc tố enterotoxin A, 3 (3. 19%) mẫu mang gen mă hóa độc tố enterotoxin B.
Kết luận: Multiplex PCR phát hiện sự hiện diện và phân bố của gen mă hóa độc tố SEA, SEB trong thức ăn nhanh tại thành phố Hồ Chí Minh. Đồng thời có thể dùng quy tŕnh multiplex này để phát hiện trực tiếp gen mă hóa độc tố của S. aureus trong thực phẩm.
Diep The Tai(1), Nguyen Thi Nguyet(2), Truong Xuan Lien(2), Pham Minh Thu(2)
(1) Laboratory of bacteriology,Pasteur Institute in HCM City
(2) Laboratory of Medical clinic analysis, Pasteur Institute in HCM City
Objectives: To investigate and apply multiplex PCR to detection of the SEA, SEB genes of enterotoxin Staphylococcus aureus in ready-to-eat food in HCM city.
Methods: A total of 30 strains collected from 2004 – 2005 years, multiplex PCR was been used to simultaneous detection of SEA, SEB genes of enterotoxigenic S. aureus. Then, this protocol was applied to direct detection of SEA, SEB in 94 food samples.
Results: Of the 30 strains, the size of the amplified PCR products were 270 bp, 165 bp for enteotoxin gens respectively. None of the specific primer pairs cross–reacted with each other. The specificity is 100% and the sensitivity is 104 CFU/ml. Four (4%) of SEA, three (3. 19%) of SEB in 94 food samples.
Conclusion: Multiplex PCR detect and research the distribution of SEA, SEB in ready-to-eat food in HCM city. And, this protocol can be used direct detection of SEA, SEB genes of enterotoxigenic Staphylococcus aureus in food.