Dans cette étude,
la technique de RT/PCR a été mise en oeuvre réalisée à l’aide des amorces
oligonucléotidiques de séquence consensus et puis couplée à une semi-nested-PCR
en utilisant des amorces spécifiques de type DEN (Lanciotti et coll., 1992).
98 malades
atteints de dengue ont été sélectionnés dans 2 hôpitaux pédiatriques No.1 et 2
d’HôChiMinh Ville (1995–1996) et classifiés comme suit: 2 cas de dengue (DF),
42 cas de dengue hémorrhagique (DH) et 54 cas de “dengue shock syndrome ”
(DSS). Ces sérums séquentiels ont été testés par RT/PCR et par isolement viral
sur les cellules C6/36. Neuf souches du virus (1 de dengue-1, 6 de dengue-2 et
2 de dengue-3) ont été isolées en culture cellulaire. De même, ces sérums
positifs en isolement viral sont aussi positifs en RT/PCR. De plus, parmi les
57 malades dont les sérums étaient négatifs à l’isolement viral, 32 sont
positifs en RT/PCR.
Dans l’étude de
la cinétique de la virémie par RT/PCR, l’ARN viral est détecté dans les sérums
dès le 3ème jour de la fièvre (6/6 cas). La clearance moyenne de l’ARN viral
dans le sérum est de 5 jours et chez 17% des malades il y a persistance du
signal PCR jusqu’au 5ème-9ème jour de la maladie.
Nos résultats
démontrent que la RT/PCR est une méthode spécifique, sensible, et rapide pour
détecter l’ARN du virus de la dengue dans le sérum des malades qui contribue à
l’étude de la physio-pathologie de la maladie.